Entosis是一种非凋亡细胞死亡方式，由活细胞钻入相邻细胞形成Cell-in-Cell（CIC）结构继而导致内部细胞发生死亡，在包括基因组稳定、肿瘤进化以及胚胎发育等多种生物学过程中发挥重要作用【1,2】。研究表明，entotic CIC结构形成依赖于粘附连接（adherens junction，AJ）和肌动球蛋白收缩（contractile actomyosin，CA）这两个核心结构元件的协同作用【3,4】。但介导AJ和CA协同作用的结构基础和分子机制并不清楚。

　　研究人员首先利用免疫荧光实时动态成像技术，捕捉到entotic CICs形成过程中内外细胞交界处持续存在一种特殊的环状结构，并鉴定出该结构主要由vinculin分子构成。随后借助超高分辨率显微镜（SIM）层扫摄影且进行3D重构，发现E-cadherin在空间上被胞质Vinculin夹在中间，形成三明治样结构。

　　图A展示了entotic CICs形成过程中内外细胞交界处存在的一种特殊环状结构。绿色表示E-cadherin。图B展示了着力环处内外细胞的E-cadherin在空间上被vinculin夹在中间，形成的三明治样结构。绿色表示E-cadherin，红色表示vinculin。图C展示了vinculin位于着力环处而MLC则分布在内细胞的后皮质处。绿色表示vinculin，红色表示MLC。

　　Vinculin是一种力敏蛋白，可通过增强α-catenin和F-actin之间的相互作用来稳定E-cadherin介导的AJ。研究人员利用免疫染色和荧光共振能量转移实验证实，在entotic CICs形成过程中，vinculin在着力环处介导了力的传递，证实了富集Vinculin分子的MR是一种机械传感器，可以充当AJ和CA之间的连接元件以促进CICs的形成。进一步为了探索在CICs形成过程中MR、AJ和CA之间的动态相互作用，分别使用Y27632和EDTA抑制CA和AJ。抑制CA和AJ均可导致MR消失，并明显抑制CICs形成进程，表明MR是在功能上与CA收缩、细胞间粘附共同参与CICs形成。研究人员进一步发现，在多个细胞系中，敲低Vinculin会阻断MR和CICs的形成，然而，几乎不影响AJ和CA相关分子表达，表明了富含Vinculin的MR对于entotic CICs的形成是必需的，且可以作为关键结构元件协调AJ和CA两个已知的核心元件。

　　该研究提出了介导Entotic CICs形成的三元（AJ-MR-CA）工作模型：细胞-细胞间连接的E-cadherin介导的AJ通过β-CTN/α-CTN与皮质F-actin相连，而CA在远离细胞连接的后皮质收缩。细胞连接触发了α-CTN中vinculin结合区（VBR）的暴露。暴露的VBR与邻近vinculin的头部结构域结合，导致vinculin发生构象变化并释放其尾部结构域，然后与F-actin相互作用。在存在张力的情况下，vinculin以这种方式被募集在MR处，从而加强α-CTN与肌动蛋白的连接，最终促进CICs的形成。

　　该论文第一作者为南方医科大学博士研究生王嫚娜、军事科学院军事医学研究院助理研究员牛祖彪、南方医科大学硕士研究生覃鸿泉。军事科学院军事医学研究院孙强研究员、南方医科大学马骊教授、首都医科大学北京世纪坛医院黄红艳教授为该论文的共同通讯作者。