透射电子显微镜(TEM)是研究材料微结构zui直接的表征技术之一,能够在纳米到原子尺度对材料微结构进行成像与分析,目前,应用于材料的电学参数表征方法可以分为两大类:一类为宏观尺度技术,比如四点探针法或范德堡法,光学测量等,允许快速检测,但只能提供直流电导率等单一参数信息,另一类为纳米尺度的技术,如拉曼光谱、原子力显微镜、扫描电镜、透射电镜等,能够得到分辨率很高的图像,然而通常需要复杂的样品制备步骤,并且测量速度十分缓慢,无法实现高速测量。
在透射电镜中,用电子束代替平行入射光束,用薄膜状的样品代替周期性结构物体,就可重复以上衍射成像过程,(2)对于透射电镜,改变中间镜的电流,使中间镜的物平面从一次像平面移向物镜的后焦面,可得到衍射谱,固定的目的主要是终止组织细胞的生化过程,同时把它们的超微结构改变控制在zui小范围内,并保护这些结构在后续的脱水、包埋等过程中不被破坏;常用双固定法,用一定浓度的戊二醛对样品预固定,漂洗后使用锇酸对样品进行后固定。
锇酸是强氧化剂,固定脂类、膜结构,有电子染色作用,3脱水,用适当的有机溶剂取代组织和细胞中的游离态水分,使之能与包埋剂混合,脱水要彻底,更换液体动作要迅速,脱水时间不宜过长,且固定后的样品要充分漂洗,4渗透、包埋与聚合,4,1渗透,2包埋与聚合,加温在60℃聚合形成固体基质,牢固地支撑整个细胞结构或组织,制成适于机械切割的固体树脂包埋块,利于切片,常用玻璃刀、钻石刀进行超薄切片,刀上要装水槽,并注入槽液。