在透射电镜中，用电子束代替平行入射光束，用薄膜状的样品代替周期性结构物体，就可重复以上衍射成像过程，（2）对于透射电镜，改变中间镜的电流，使中间镜的物平面从一次像平面移向物镜的后焦面，可得到衍射谱，固定的目的主要是终止组织细胞的生化过程，同时把它们的超微结构改变控制在zui小范围内，并保护这些结构在后续的脱水、包埋等过程中不被破坏；常用双固定法，用一定浓度的戊二醛对样品预固定，漂洗后使用锇酸对样品进行后固定。

2切片厚度50～100nm为宜：太薄反差低；太厚反差好，但结构重叠，电子束不能穿透；，3切片应耐电子束的强烈照射，不变形不升华；，4切片能够适当被染色，保证一定的反差；，5切片均匀，无影响拍照的皱褶、刀痕或染色污染，其中，DigitalMicrograph不仅能够自动识别Gatan公司电镜拍摄的dm3、dm4、Tif文件中的标尺、放大倍数、仪器型号等信息，还能够对图片中进行上伪色突出对比度、选区傅里叶变换、划线取向灰度分析等。

锇酸是强氧化剂，固定脂类、膜结构，有电子染色作用，3脱水，用适当的有机溶剂取代组织和细胞中的游离态水分，使之能与包埋剂混合，脱水要彻底，更换液体动作要迅速，脱水时间不宜过长，且固定后的样品要充分漂洗，4渗透、包埋与聚合，4，1渗透，2包埋与聚合，加温在60℃聚合形成固体基质，牢固地支撑整个细胞结构或组织，制成适于机械切割的固体树脂包埋块，利于切片，常用玻璃刀、钻石刀进行超薄切片，刀上要装水槽，并注入槽液。