2切片厚度50~100nm为宜:太薄反差低;太厚反差好,但结构重叠,电子束不能穿透;,3切片应耐电子束的强烈照射,不变形不升华;,4切片能够适当被染色,保证一定的反差;,5切片均匀,无影响拍照的皱褶、刀痕或染色污染,其中,DigitalMicrograph不仅能够自动识别Gatan公司电镜拍摄的dm3、dm4、Tif文件中的标尺、放大倍数、仪器型号等信息,还能够对图片中进行上伪色突出对比度、选区傅里叶变换、划线取向灰度分析等。
沿管壁缓慢加入戊二醛预固定液,不要冲击细胞团,静置30min后可送样,请在4~10℃保存或运输,严禁结冰(太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使样品结冰,冬季宁可常温送样),细胞高速离心收集方法,本方法过去被大多数单位采用,没有“GT2”时的应急取材也可使用,各仪器公司的拍摄控制软件是比较专业化的处理工具,能够在处理基本粒径分析、晶面间距等测量外,还能够进行傅里叶变换、降噪处理等,得到更加深入的数据结果。
染色方法有单染,包括铅盐单染和铀盐单染;双染色,醋酸铀染色和柠檬酸铅染色,双染色呈现结果更全面,我们一般采用的双染法进行染色,常用染色剂:醋酸铀,有微弱的放射性,主要染核酸、核蛋白、细胞核、结缔组织,柠檬酸铅,主要染膜结构、脂类、糖原等,易与CO2反应成沉淀,染色中应采取措施避免,电镜照片主要解析粒径分布、单晶/多晶、晶面结构、元素和原子分散,其本质是信号的空间分布,基本机理与比例尺地图是一致的。