在透射电镜中,用电子束代替平行入射光束,用薄膜状的样品代替周期性结构物体,就可重复以上衍射成像过程,(2)对于透射电镜,改变中间镜的电流,使中间镜的物平面从一次像平面移向物镜的后焦面,可得到衍射谱,固定的目的主要是终止组织细胞的生化过程,同时把它们的超微结构改变控制在zui小范围内,并保护这些结构在后续的脱水、包埋等过程中不被破坏;常用双固定法,用一定浓度的戊二醛对样品预固定,漂洗后使用锇酸对样品进行后固定。
沿管壁缓慢加入戊二醛预固定液,不要冲击细胞团,静置30min后可送样,请在4~10℃保存或运输,严禁结冰(太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使样品结冰,冬季宁可常温送样),细胞高速离心收集方法,本方法过去被大多数单位采用,没有“GT2”时的应急取材也可使用,各仪器公司的拍摄控制软件是比较专业化的处理工具,能够在处理基本粒径分析、晶面间距等测量外,还能够进行傅里叶变换、降噪处理等,得到更加深入的数据结果。
锇酸是强氧化剂,固定脂类、膜结构,有电子染色作用,3脱水,用适当的有机溶剂取代组织和细胞中的游离态水分,使之能与包埋剂混合,脱水要彻底,更换液体动作要迅速,脱水时间不宜过长,且固定后的样品要充分漂洗,4渗透、包埋与聚合,4,1渗透,2包埋与聚合,加温在60℃聚合形成固体基质,牢固地支撑整个细胞结构或组织,制成适于机械切割的固体树脂包埋块,利于切片,常用玻璃刀、钻石刀进行超薄切片,刀上要装水槽,并注入槽液。